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常规染色HE染色中常见问题及注意事项

2024-06-30 13:05病理科

、固定不当

甲醛固定液失效、固定时间不充分或未及时固定,都可以导致细胞着色差、轮廓模糊等,因此应及时更换固定液,对组织标本做到及时、及早和充分固定,以保证组织切片质量。

二、脱蜡不净

(1)组织切片脱蜡不彻底时,可出现组织切片局部不着色或着色淡等,应延长脱蜡时间;室温较低时应增加脱蜡时间,或将组织切片放入二甲苯后,置入温箱中加温脱蜡。

(2)组织片比较厚或二甲苯使用时间过长,可出现整张切片不着色或着色较差的情况,应延长脱蜡时间或更换二甲苯。

三、染色与分化不当

(1)染液量不足,没有完全浸没组织切片,切片局部可出现不着色的现象,应立即添加染液,确保染液完全浸染组织。

(2)整张切片着色淡。

1) 盐酸乙醇停留时间过长所致。应该水洗后重新染苏木素,再水洗分化。

2)染液使用时间较长或失效,要延长染色时间或更新染液;室温偏低,影响着色,可放在温箱中染色。

(3)染色不当,分化不足或苏木素染色后在水中停留时间较长,染色质变蓝后,不易分化等,会使组织、细胞着色过深或对比不清晰。应该在镜下控制染色与分化程度。四、四、脱水不彻底或过度

脱水时应先从低浓度开始逐步过渡到无水乙醇。

1. 切片呈雾状 脱水、透明不彻底,可适当延长染色后的脱水、透明时间或更新脱水剂、透明剂。

2.伊红色较淡 低浓度乙醇对伊红有分化作用,缩短低浓度乙醇脱水时间或更新伊红染液。

五、封固及封固剂使用不当

1.封固剂溢出 封固剂太稀或用量太多,应增加稠度或减少用量。

2. 封固剂不足 封固剂太稀或用量太少,应增加稠度或用量。

3. 切片有空泡 封固动作慢导致切片干燥或封固剂中含有气泡,提高封固熟练程度或提前配好封固剂。

4. 盖玻片要大于组织块切片 盖玻片用前要清洁,盖玻片要按要求放置在组织切片上,避免产生气泡。

六、切片脱落

1. 烘烤不足 切片烘烤时间短或烘烤温度低,组织与载物片粘贴不牢固,应延长烘烤时间或提高烘烤温度。

2.烘烤过度 切片烘烤时间过长或烘烤温度过高导致组织焦化,应缩短烘烤时间或降低烘烤温度。

3.载物片处理不当 血栓、脑及检组织切片的载玻片须特殊处理。